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選擇一款合適的96孔PCR板。不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)、儀器和流程對耗材有著截然不同的要求。選錯(cuò)板子可能導(dǎo)致信號微弱、重復(fù)性差、甚至實(shí)驗(yàn)失敗。本指南將帶您一步步完成精準(zhǔn)匹配,確保您的qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠無誤。
第一步:明確核心實(shí)驗(yàn)類型——這是選擇的基礎(chǔ)
您的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用直接決定了所需板子的首要特性。
標(biāo)準(zhǔn)定量PCR (qPCR):
關(guān)鍵需求:良好的光學(xué)透明度和密封性。
推薦:透明板或白色板均可。如需更高靈敏度和抗串?dāng)_能力,白色板是優(yōu)選。
高靈敏度檢測(如低豐度基因、單細(xì)胞測序):
關(guān)鍵需求:信號采集,最小化背景噪音。
推薦:白色板選擇。其白色壁/底能有效反射熒光信號,顯著提升信噪比和檢測靈敏度。
快速PCR / 高速循環(huán):
關(guān)鍵需求:熱傳導(dǎo)效率,確??组g溫度一致。
推薦:選擇明確標(biāo)注 “超薄壁" 的板子,以實(shí)現(xiàn)最快的升降溫速率。
高通量篩查、基因分型:
關(guān)鍵需求:避免樣本交叉污染,適應(yīng)自動(dòng)化工作站操作。
推薦:選擇帶有全裙邊的板子,機(jī)械強(qiáng)度高,便于機(jī)械臂抓取。同時(shí)必須確保密封性絕對可靠。
第二步:匹配您的qPCR儀器——這是“專用"的關(guān)鍵 本生96孔PCR板
這是最關(guān)鍵的一步,不兼容會(huì)導(dǎo)致儀器無法識別或檢測失敗。
光學(xué)系統(tǒng):
從頂端讀取光信號的儀器(如ABI QuantStudio系列, Roche LightCycler® 480):必須使用透明蓋或光學(xué)密封膜。
從底部讀取光信號的儀器(如Bio-Rad CFX系列, Eppendorf Realplex):必須關(guān)注板底材質(zhì)。
白色板底:增強(qiáng)熒光信號,減少孔間串?dāng)_,適用于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn),是通用且高性能的選擇。
透明板底:透光性最好,但可能產(chǎn)生更多串?dāng)_。適用于需要高透光率的特殊應(yīng)用。
儀器型號:
嚴(yán)格兼容性:許多儀器有“專用"板(如Roche 480專用板)。購買前務(wù)必在產(chǎn)品說明中確認(rèn) “[您的儀器型號]"。
物理尺寸:確保板子的高度、裙邊設(shè)計(jì)能嚴(yán)絲合縫地放入您儀器的樣品槽中。
第三步:詳解關(guān)鍵性能參數(shù)——看懂產(chǎn)品說明
材質(zhì):
聚丙烯 (PP):主流材質(zhì),需為超高純度PCR級,確保無DNA酶、RNA酶、人類基因組DNA污染,且不會(huì)抑制PCR反應(yīng)。
裙邊類型:
無裙邊:便宜,但機(jī)械強(qiáng)度弱,易彎曲,主要用于手工操作。
半裙邊:周邊有一圈凸起,便于標(biāo)記和拿取,提供一定機(jī)械強(qiáng)度。
全裙邊:堅(jiān)固,適合自動(dòng)化操作,可嵌入條形碼進(jìn)行樣品追蹤。
密封方式:
光學(xué)平蓋:一次性使用,與白色板搭配是黃金標(biāo)準(zhǔn),提供最佳光學(xué)性能和密封性。
光學(xué)密封膜:需配合壓膜器使用,密封性好,適用于高通量應(yīng)用。
凸蓋/圓蓋:可重復(fù)使用,密封性不如平蓋和膜,有蒸發(fā)風(fēng)險(xiǎn),不推薦用于精密定量實(shí)驗(yàn)。
第四步:特殊考量
無菌 & 無酶:大多數(shù)商業(yè)PCR板已保證無DNase/RNase。如果實(shí)驗(yàn)對污染極度敏感(如NGS建庫),可選擇經(jīng)認(rèn)證預(yù)滅菌(如伽馬射線)的產(chǎn)品。
預(yù)制孔板:有些板子出廠時(shí)已預(yù)置了ROX等被動(dòng)參比染料,專為需要染料校正的儀器系統(tǒng)(如部分ABI機(jī)型)設(shè)計(jì),購買時(shí)需注意區(qū)分。
快速選擇流程圖
開始 → 您的qPCR儀器型號是什么? → 選擇該儀器兼容的板型
↓
您的實(shí)驗(yàn)需要高靈敏度嗎? → 是 → 選擇白色板 + 光學(xué)平蓋/密封膜
↓
否 → 透明板亦可
↓
您使用自動(dòng)化工作站嗎? → 是 → 選擇全裙邊設(shè)計(jì)
↓
否 → 半裙邊或無裙邊即可
↓
您的實(shí)驗(yàn)周期非常短嗎? → 是 → 確認(rèn)選擇“超薄壁"
↓
結(jié)束 → 確認(rèn)訂單!
總結(jié)
為實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)匹配96孔PCR板,只需遵循以上四步:
定應(yīng)用(靈敏度 通量 )
對儀器(光路 型號 )
看參數(shù)(材質(zhì) 裙邊?密封 )
查特殊(無菌 預(yù)置染料 )
注:以上資料僅供參考,具體其他信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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